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《納米研究》倒置顯微鏡MI52-N助力中科大研究團隊開(kāi)發(fā)核酸藥物脂質(zhì)納米顆粒

近日，中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)的研究團隊開(kāi)發(fā)出了一種新型的核酸藥物脂質(zhì)納米顆粒，這種顆?？梢栽?a target="_self">倒置顯微鏡MI52-N下觀(guān)察到，為核酸藥物的研究和應用提供了新的思路和方法。

核酸藥物作為一種全新的生物治療手段備受關(guān)注。其中，脂質(zhì)納米粒（LNPs）作為核酸藥物的傳遞系統，因其效效率性備受矚目。然而，LNPs在臨床應用上面臨著(zhù)一個(gè)嚴峻的挑戰：如何實(shí)現從早期開(kāi)發(fā)到臨床應用的穩健的制備規模放大。

目前，可規模放大的合成LNPs方法主要分為并行化策略和通道尺寸擴大策略。然而，并行化策略需要依賴(lài)復雜的系統搭建，并且在大規模生產(chǎn)時(shí)難以保持LNPs穩定性；而通道尺寸擴大策略盡管能夠實(shí)現穩定的大規模生產(chǎn)，但很難在不同流速下保持一致的粒徑和尺寸分布。因此，我們迫切需要一種創(chuàng )新性的方法，既能保證可擴展合成，又能保持LNPs的一致性和穩定性。

為此，中科大工程學(xué)院褚家如教授團隊的李保慶副教授與生命科學(xué)與醫學(xué)部田長(cháng)麟教授團隊經(jīng)過(guò)深入研究，提出了一種“等比例縮放通道尺寸”的可擴展化脂質(zhì)納米粒子合成策略。該策略通過(guò)在三個(gè)維度上等比例縮放慣性微流體混合器，實(shí)現了LNPs的可擴展合成。同時(shí)，我們基于流體力學(xué)的相似性理論并利用無(wú)量綱分析開(kāi)發(fā)了一種理論預測方法，通過(guò)控制混合時(shí)間在不同芯片上保持一致，確保合成的LNPs具有一致的粒徑和尺寸分布。這一創(chuàng )新性方法為L(cháng)NPs的大規模生產(chǎn)提供了實(shí)際可行的途徑，加速了核酸藥物研發(fā)向臨床應用的轉化。相關(guān)成果發(fā)表在Nano Research上。中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)博士生馬澤森和童海洋為該論文共同主作者。

以下結果圖片均截取自文中（使用廣州明美的倒置顯微鏡MI52-N拍攝）

圖1 使用慣性混合器表征混合特性和微調脂質(zhì)納米粒子的大小。(a) 不同流速比下混合時(shí)間與總流速的函數關(guān)系。實(shí)線(xiàn)表示充分混合，虛線(xiàn)表示不充分混合。在本實(shí)驗中，混合器的通道尺寸為 250 μm，混合時(shí)間是通過(guò)明美倒置顯微鏡拍攝后進(jìn)行計算。(b) 不同混合時(shí)間下 C12-200 LNPs 和中性 LNPs 的平均粒徑，使用 250 μm 的混合器，FRR 為 5:1結果為三個(gè)獨立批次的平均值 ± SD。

圖2 慣性流混合器中流動(dòng)狀態(tài)和混合特性的演變。(a) 前三個(gè)混合元件中流體在層流（Re= 25和 132）和湍流（Re= 396）時(shí)的流動(dòng)俯視圖，使用明美倒置顯微鏡拍攝。(b) 不同流動(dòng)距離下混合物流的混合指數。不同流動(dòng)距離下的混合指數，FRR 為 5:1?；旌现笖涤糜谠u估混合過(guò)程，0.95 的值被設定為可接受的充分混合下限。(c) 不同流速比下混合時(shí)間與雷諾數的函數關(guān)系。實(shí)線(xiàn)表示充分混合，虛線(xiàn)表示不充分混合。所用混合器的通道尺寸為 250 微米。

圖3通道尺寸為100、250和500μm的混合器的前兩個(gè)混合元件的流態(tài)俯視圖。流動(dòng)狀態(tài)包括層流（Re=25和132）、瞬態(tài)流（Re=264）和湍流（Re=396）。圖像經(jīng)過(guò)數字處理以增強對比度。將溶解有黑色染料（0.025g/mL）作為示蹤劑的去離子水和乙醇以3:1的FRR泵入混合器中。流動(dòng)方向是從左到右。

圖4 脂質(zhì)納米粒子合成平臺。利用顯微鏡拍攝微通道內的混合情況。

明美倒置顯微鏡MI52-N是一款無(wú)限遠光學(xué)系統的倒置顯微鏡，具有明場(chǎng)和相襯觀(guān)察方式，并可升級熒光觀(guān)察，可滿(mǎn)足透明樣品（如細胞、線(xiàn)蟲(chóng)等）的觀(guān)測，適用于常見(jiàn)培養皿或切片樣品觀(guān)察，可用于微流控、細胞培養、組織培養、透明材料等應用。

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