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原理：活細胞和未染色的生物標本，因細胞各部細微結構的折射率和厚度的不同，光波通過(guò)時(shí)，波長(cháng)和振幅并不發(fā)生變化，僅相位發(fā)生變化（振幅差），這種振幅差人眼無(wú)法觀(guān)察。而相差顯微鏡通過(guò)改變這種相位差，并利用光的衍射和干涉現象，把相差變?yōu)檎穹顏?lái)觀(guān)察活細胞和未染色的標本。

相差顯微鏡和普通顯微鏡的區別是：用環(huán)狀光闌代替可變光闌， 用帶相板的物鏡代替普通物鏡，并帶有一個(gè)合軸用的望遠鏡。相差顯微鏡一般都具有明場(chǎng)顯微鏡的功能。

測試一：通過(guò)圖片來(lái)對比相差和明場(chǎng)，樣品呈現出的不同效果，樣品由廣西民族大學(xué)某實(shí)驗室提供。（設備：奧林巴斯CKX41；相機：廣州明美顯微成像系統MC25；樣品：培養瓶?jì)鹊募毎?/p>

使用10倍的明場(chǎng)物鏡，細胞的形態(tài)并不清晰

使用10倍的相差聚光鏡和物鏡，細胞以浮雕感的形態(tài)清晰地呈現

所以：需要做細胞培養的科學(xué)實(shí)驗，相差顯微鏡是*的基礎工具。

測試二，使用平場(chǎng)物鏡和相差物鏡拍攝熒光染色細胞，圖像有何區別： （設備：奧林巴斯CKX41；相機：廣州明美顯微成像系統MC25；樣品：培養瓶?jì)鹊募毎?/p>

使用10倍平場(chǎng)物鏡的細胞熒光染色圖片

使用10倍相差物鏡拍攝的細胞熒光圖片

可以得出：使用平場(chǎng)物鏡拍攝熒光圖片亮度更亮。原因是相差物鏡內含有相差環(huán)，會(huì )阻擋部分光線(xiàn)。建議在拍弱熒光時(shí)，務(wù)必使用平場(chǎng)物鏡。