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◇ 偏光顯微鏡簡(jiǎn)介
偏光顯微鏡簡(jiǎn)介
來(lái)源:技術(shù)文章 更新時(shí)間:2013-03-29 瀏覽:1867次
偏光顯微鏡
偏光顯微鏡
(Polarizingmicroscope)是用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種顯微鏡。凡具有雙折射的物質(zhì),在偏光顯微鏡下就能分辨的清楚,當然這些物質(zhì)也可用染色法來(lái)進(jìn)行觀(guān)察,但有些則不可能,而必須利用偏光顯微鏡。反射偏光顯微鏡是利用光的偏振特性對具有雙折射性物質(zhì)進(jìn)行研究鑒定的*儀器, 可供廣大用戶(hù)做單偏光觀(guān)察,正交偏光觀(guān)察,錐光觀(guān)察。
偏光顯微鏡
主要特點(diǎn)
將普通光改變?yōu)槠窆膺M(jìn)行鏡檢的方法,以鑒別某一物質(zhì)是單折射(各向同性)或雙折射性(各向異性)。雙折射性是晶體的基本特性。因此,偏光顯微鏡被廣泛地應用在礦物、化學(xué)等領(lǐng)域,在生物學(xué)和植物學(xué)也有應用。
偏光顯微是鑒定物質(zhì)細微結構光學(xué)性質(zhì)的一種顯微鏡。凡具有雙折射性的物質(zhì),在偏光顯微鏡下就能分辨的清楚,當然這些物質(zhì)也可用染色法來(lái)進(jìn)行觀(guān)察,但有些則不可能,而必須利用偏光顯微鏡。
偏光顯微鏡的特點(diǎn),就是將普通光改變?yōu)槠窆膺M(jìn)行鏡檢的方法,以鑒別某一物質(zhì)是單折射性(各向同性)或雙折射性(各向異性)。
雙折射性是晶體的基本特征。因此,偏光顯微鏡被廣泛地應用在礦物、高分子、纖維、玻璃、半導體、化學(xué)等領(lǐng)域。在生物學(xué)中,很多結構也具有雙折射性,這就需要利用偏光顯微鏡加以區分。在植物學(xué)方面,如鑒別纖維、染色體、紡錘絲、淀粉粒、細胞壁以及細胞質(zhì)與組織中是否含有晶體等。在植物病理上,病菌的入侵,常引起組織內化學(xué)性質(zhì)的改變,可以偏光顯微術(shù)進(jìn)行鑒別。
偏光顯微鏡
基本原理
?。ㄒ唬﹩握凵湫耘c雙折射性:光線(xiàn)通過(guò)某一物質(zhì)時(shí),如光的性質(zhì)和進(jìn)路不因照射方向而改變,這種物質(zhì)在光學(xué)上就具有“各向同性”,又稱(chēng)單折射體,如普通氣體、液體以及非結晶性固體;若光線(xiàn)通過(guò)另一物質(zhì)時(shí),光的速度、折射率、吸收性和偏振、振幅等因照射方向而有不同,這種物質(zhì)在光學(xué)上則具有“各向異性”,又稱(chēng)雙折射體,如晶體、纖維等。 (二)光的偏振現象:光波根據振動(dòng)的特點(diǎn),可分為自然光與偏振光。自然光的振動(dòng)特點(diǎn)是在垂直光波傳導軸上具有許多振動(dòng)面,各平面上振動(dòng)的振幅分布相同;自然光經(jīng)過(guò)反射、折射、雙折射及吸收等作用,可得到只在一個(gè)方向上振動(dòng)的光波,這種光波則稱(chēng)為“偏光”或“偏振光”。 (三)偏光的產(chǎn)生及其作用:偏光顯微鏡zui重要的部件是偏光裝置——起偏器和檢偏器。過(guò)去兩者均為尼科爾(Nicola)棱鏡組成,它是由天然的方解石制作而成,但由于受到晶體體積較大的限制,難以取得較大面積的偏振,近來(lái)偏光顯微鏡則采用人造偏振鏡來(lái)代替尼科爾梭鏡。 人造偏振鏡是以硫酸喹啉又名Herapathite的晶體制作而成,呈綠橄欖色。當普通光通過(guò)它后,就能獲得只在一直線(xiàn)上振動(dòng)的直線(xiàn)偏振光。 偏光顯微鏡有兩個(gè)偏振鏡,一個(gè)裝置在光源與被檢物體之間的叫“起偏鏡”;另一個(gè)裝置在物鏡與目鏡之間的叫“檢偏鏡”,有手柄伸手鏡筒或中間附件外方以便操作,其上有旋轉角的刻度。 從光源射出的光線(xiàn)通過(guò)兩個(gè)偏振鏡時(shí),如果起偏鏡與檢偏鏡的振動(dòng)方向互相平行,即處于“平行檢偏立”的情況下,則視場(chǎng)zui為明亮。反之,若兩者互相垂直,即處于“正交校偏位”的情況下,則視場(chǎng)*黑暗,如果兩者傾斜,則視場(chǎng)表明出中等程度的亮度。由此可知,起偏鏡所形成的直線(xiàn)偏振光,如其振動(dòng)方向與檢偏鏡的振動(dòng)方向平行,則能*通過(guò);如果偏斜,則只以通過(guò)一部分;如若垂直,則*不能通過(guò)。因此,在采用偏光顯微鏡檢時(shí),原則上要使起偏鏡與檢偏鏡處于正交檢偏位的狀態(tài)下進(jìn)行。
?。ㄋ模┱粰z偏位下的雙折射體:在正交的情況下,視場(chǎng)是黑暗的,如果被檢物體在光學(xué)上表現為各向同性(單折射體),無(wú)論怎樣旋轉載物臺,視場(chǎng)仍為黑暗,這是因為起偏鏡所形成的線(xiàn)偏振光的振動(dòng)方向不發(fā)生變化,仍然與檢偏鏡的振動(dòng)方向互相垂直的緣故。若被檢物體具有雙折射特性或 含有具雙折射特性的物質(zhì),則具雙折射特性的地方視場(chǎng)變亮,這是因為從起偏鏡射出的直線(xiàn)偏振光進(jìn)入雙折射體后,產(chǎn)生振動(dòng)方向不同的兩種直線(xiàn)偏振光,當這兩種光通過(guò)檢偏鏡時(shí),由于另一束光并不與檢偏鏡偏振方向正交,可透過(guò)檢偏鏡,就能使人眼看到明亮的象。光線(xiàn)通過(guò)雙折射體時(shí),所形成兩種偏振光的振動(dòng)方向,依物體的種類(lèi)而有不同。
雙折射體在正交情況下,旋轉載物臺時(shí),雙折射體的象在360°的旋轉中有四次明暗變化,每隔90°變暗一次。變暗的位置是雙折射體的兩個(gè)振動(dòng)方向與兩個(gè)偏振鏡的振動(dòng)方向相一致的位置,稱(chēng)為“消光位置”從消光位置旋轉45°,被檢物體變?yōu)閦ui亮,這就是“對角位置”,這是因為偏離45°時(shí),偏振光到達該物體時(shí),分解出部分光線(xiàn)可以通過(guò)檢偏鏡,故而明亮。根據上述基本原理,利用偏光顯微術(shù)就可能判斷各向同性(單折射體)和各向異性(雙折射體)物質(zhì)。
?。ㄎ澹└缮嫔涸谡粰z偏位情況下,用各種不同波長(cháng)的混合光線(xiàn)為光源觀(guān)察雙折射體,在旋轉載物臺時(shí),視場(chǎng)中不僅出現zui亮的對角位置,而且還會(huì )看到顏色。出現顏色的原因,主要是由干涉色而造成(當然也可能被檢物體本身并非無(wú)色透明)。干涉色的分布特點(diǎn)決定于雙折射體的種類(lèi)和它的厚度,是由于相應推遲對不同顏色光的波長(cháng)的依賴(lài)關(guān)系,如果被檢物體的某個(gè)區域的推遲和另一區域的推遲不同,則透過(guò)檢偏鏡光的顏色也就不同。
偏光顯微鏡
技術(shù)參數
光學(xué)系統:ICCS光學(xué)系統鏡體:FEM設計ACR編碼
1、物鏡:5X、10X、20X、50X 可選1.25X、2.5X、100X
2、目鏡:10X/23
3、物鏡轉盤(pán):6孔對中物鏡轉盤(pán)
4、觀(guān)察方式:透射光:明場(chǎng)、單偏光、正交偏光、錐光
反射光:明場(chǎng)、暗場(chǎng)、單偏光、正交偏光、熒光、微分干涉
5、數字化圖像分析工作站:計算機、打印機、數字攝像頭、軟件
6、可配冷熱臺
7、可配顯微分光光度計(測量反射率)
偏光顯微鏡
裝置要求
1、光源
采用單色光,因為光的速度,折射率,和干涉現象由于波長(cháng)的不同而有差異。一般鏡檢可使用普通光。
2.物鏡:應使用無(wú)應消色差物鏡,因復消色差和半復消色差物鏡本身常發(fā)生偏振光。
3、目鏡
要帶有十字線(xiàn)的目鏡。
4、聚光鏡
為了取得平行偏光,應使用能推出上透鏡的搖出式聚光鏡。
5、伯特蘭透鏡
聚光鏡光路中的輔助部件,這是把物體所有造成的初級相放大為次級相的輔助透鏡。它可保證用目鏡來(lái)觀(guān)察在物鏡后焦平面中形成的平涉圖樣。
偏光顯微鏡
檢術(shù)要求
1、載物臺的中心與光軸同軸。
2、起偏鏡和檢偏鏡應處于正交位置。
3、制片不宜過(guò)薄。
偏光顯微鏡
校正偏振片
在實(shí)際操作中,偏正顯微鏡上下偏振鏡的振動(dòng)方向要互相正交,或東西和南北方向,各自與目鏡十字絲的橫、縱方向一致。有時(shí)只用一個(gè)下偏振鏡來(lái)觀(guān)測,必須確定下偏振鏡的振動(dòng)方向,因此操作時(shí)必須對偏振鏡進(jìn)行校正。
1、目鏡十字絲的檢測
一般要檢查目鏡十字絲是否正交,以及是否與上下偏振鏡振動(dòng)方向一致,同時(shí)選一塊解理和清晰的黑云母,移至目鏡十字絲的中心,將解理縫平行于十字絲的一根絲,記下載物臺的刻度數,再轉動(dòng)載物臺使解理縫平行于另一十字絲,記下載物臺的刻度數,兩個(gè)刻度數之差為90°,說(shuō)明十字絲正交。
2、下偏振鏡振動(dòng)方向的確定和校正
一般用黑云母來(lái)檢查下偏振鏡的振動(dòng)方向,這是因為黑云母是一種分布廣泛的透明礦物,在單偏光下很有特征:首先找一塊解理和清晰的黑云母,移至目鏡十字絲中心,推出上偏光鏡,轉動(dòng)載物臺一周,觀(guān)察黑云母顏色的變化,因為黑云母對解理方向的振動(dòng)光吸收zui強,所以使黑云母顏色達到zui深時(shí),解理縫的方向就是下偏光鏡的振動(dòng)方向。
3、上下偏振鏡正交的校正
下偏振鏡的方向校正好之后,取下薄片,推入上偏振鏡,觀(guān)察視域是否處于消光狀態(tài),如果全黑,則表明上下偏光的振動(dòng)方向互相正交,否則,上偏振鏡須進(jìn)行校正,即轉動(dòng)上偏振鏡,使視域達到zui暗為止。轉動(dòng)時(shí)必須先松開(kāi)上偏振鏡的止動(dòng)螺絲,校正好后再擰緊。
偏光顯微鏡
日常維護、保養及注意事項
為保證系統的使用壽命及可靠性,注意以下事項:
1.試驗室應具備三防條件:防震(遠離震源)、防潮(使用空調、干燥器)、防塵(地面鋪上地板);電源:220V+-10%,50HZ溫度:0度-40度.
2.調焦時(shí)注意不要使物鏡碰到試樣,以免劃傷物鏡。
3.當載物臺墊片圓孔中心的位置遠離物鏡中心位置時(shí)不要切換物鏡,以免劃傷物鏡。
4.亮度調整切忌忽大忽小,也不要過(guò)亮,影響燈泡的使用壽命,同時(shí)也有損視力。
5.所有(功能)切換,動(dòng)作要輕,要到位。
6.關(guān)機時(shí)要將亮度調到zui小。
7.非專(zhuān)業(yè)人員不要調整照明系統(燈絲位置燈),以免影響成像質(zhì)量。
8.更換鹵素燈時(shí)要注意高溫,以免灼傷;注意不要用手直接接觸鹵素燈的玻璃體。
9.關(guān)機不使用時(shí),將物鏡通過(guò)調焦機構調整到zui低狀態(tài)。
10.關(guān)機不使用時(shí),不要立即該蓋防塵罩,待冷卻后再蓋,注意防火。
11.不經(jīng)常使用的光學(xué)部件放置于干燥皿內。
12.非專(zhuān)業(yè)人員不要嘗試擦物鏡及其它光學(xué)部件。目鏡可以用脫脂棉簽蘸1:1比例(*:乙醚)混合液體甩干后擦拭,不要用其他液體,以免損傷目鏡。
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