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倒置熒光顯微鏡，是指與一般顯微鏡相比，其物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過(guò)來(lái)，由熒光附件與顯微鏡有機結合構成的顯微鏡。激發(fā)光從物鏡向上落射到標本表面，被反射到物鏡中并聚集在樣品上，樣品所產(chǎn)生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發(fā)光同時(shí)進(jìn)入物鏡，經(jīng)雙色束分離器使激發(fā)光和熒光分開(kāi)而成像。

 

倒置顯微鏡具有在培養瓶或培養皿內進(jìn)行顯微觀(guān)察的特點(diǎn)；可以觀(guān)察不經(jīng)染色的透明活體；落射熒光顯微適用于熒光顯微術(shù)。該儀器特別適用于對活體細胞和組織、流質(zhì)、沉淀物等進(jìn)行顯微研究，是生物學(xué)，細胞學(xué)，腫瘤學(xué)，遺傳學(xué)，免疫學(xué)等研究工作的理想儀器?？晒┛蒲?、高校、醫療、防疫和農牧等部門(mén)使用。

 

倒置熒光顯微鏡的功能之一是熒光觀(guān)察，其基本原理是利用激發(fā)光激發(fā)樣本產(chǎn)生熒光，從而實(shí)現樣本的形狀與定位觀(guān)察，主要適用于熒光標記樣本的觀(guān)察。熒光觀(guān)察是倒置熒光顯微鏡的重要功能，其配件昂貴且使用特殊。要想醫學(xué)研究生正確地掌握熒光觀(guān)察的操作使用規范，教師除了教會(huì )他們掌握基本的操作方法，同時(shí)更為重要的是教會(huì )他們掌握它的特殊性。首先，在標本制作中，載玻片和蓋玻片應表面光潔且厚度適宜(載玻片在0.8mm~1.2mm之間，蓋玻片在0.17mm左右)；標本應厚度適宜，同時(shí)避免細胞重疊或雜質(zhì)掩蓋；封裱劑應使用甘油和碳酸鹽緩沖液(0.5mol/L PH9.0～9.5)的等量混合液。其次，在熒光觀(guān)察前，應關(guān)閉房間內的電燈和倒置熒光顯微鏡的白光，確保處于暗室環(huán)境。最后，在熒光觀(guān)察中，應嚴格控制觀(guān)察時(shí)間，一般以1~2小時(shí)/次為宜，否則熒光會(huì )出現衰減和消失的現象；調整光源時(shí)應佩戴防護眼鏡，避免紫外線(xiàn)對眼鏡的傷害。