熒光顯微鏡是用短波長(cháng)的光線(xiàn)照射用熒光素染色過(guò)的被檢物體,使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長(cháng)波長(cháng)的熒光,然后觀(guān)察。熒光顯微鏡廣泛應用于生物,醫學(xué)等領(lǐng)域。
熒光顯微鏡的正確使用方法:
1.右手握住熒光顯微鏡鏡臂,左手托住鏡座。
2.把熒光顯微鏡放在實(shí)驗臺上,略偏左(顯微鏡放在距實(shí)驗臺邊緣7厘米左右處)。安裝好目鏡和物鏡。
3.轉動(dòng)轉換器,使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。
4.把一個(gè)較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開(kāi),同時(shí)畫(huà)圖)。轉動(dòng)反光鏡,使光線(xiàn)通過(guò)通光孔反射到鏡筒內。通過(guò)目鏡,可以看到白亮的視野。
5.把所要觀(guān)察的玻片標本(也可以用印有“6”字的薄紙片制成)放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。
6.轉動(dòng)粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(眼睛看著(zhù)物鏡,以免物鏡碰到玻片標本)。
7.左眼向目鏡內看,同時(shí)反方向轉動(dòng)粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉動(dòng)細準焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
注意事項:
1、激發(fā)光長(cháng)時(shí)間的照射,會(huì )發(fā)生熒光的衰減和淬滅現象,因此盡可能縮短觀(guān)察時(shí)間,暫時(shí)不觀(guān)察時(shí),應用擋板遮蓋激發(fā)光。
2、作油鏡觀(guān)察時(shí),應用"無(wú)熒光油"。
3、熒光幾乎都較弱,應在較暗的室內進(jìn)行。
4、電源裝穩壓器,否則電壓不穩不僅會(huì )降低汞燈的壽命,也會(huì )影響鏡檢的效果。目前許多新興生物研究領(lǐng)域應用到熒光顯微鏡,如基因原位雜交(FISH)等等。